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灭菌彻底灭菌仓内叠放料袋时要堆叠合理,纵向每4排料袋约宽60cm作为一行,行与行之间要留有空隙,以使蒸汽均匀循环。用旺火烧到罩膜鼓起时,排出冷空气,当罩膜内温度达到100P时,连续保持24~30h,才可以停火降温;注意加温过程中要适时加水,保持水在规定的水位范围内,加水过程中要保证罩膜内温度不下降。灭菌时,防止灭菌罩膜漏气,要注意蒸汽炉的蒸汽发生量与灭菌物数量相匹配,灭菌袋数增加,应相应延长灭菌时间。接种时防止料温太高料温太高,超过38t,易烧死菌种,好是在灭菌后的料袋还有余温(32~35t)时接种。提供适宜的培菌环境在培养室或塑料薄膜大棚内暗光培养,好保持七分阴三分阳,以利菌丝生长。鼠害。发菌阶段,要定期检查、翻堆、通风,严防料温上升到32t以上而出现“烧菌”现象;发菌期间培养室(棚)内温度低于20t,可用火加温,每天中午通风1~2h。菌丝爬满木段后,再在弱光环境中培养20d以上,促使菌丝老化,培菌时间需2~3个
种植流程截椴装袋将原材截成30cm长的短椴木,直径超过20cm者,辟开材树皮朝外,用利刀修光断面、枝叉面,以免剌破袋膜,引起感染杂菌,将木材装入40x65cm规格的0.005厚的低压聚乙烯袋内,每袋装3---6段,用绳子扎紧袋口。蒸汽灭菌将菌袋按排叠放,排间留有20厘米的空隙,采用一层横排一层竖排“井”字形叠放,排放好底层覆盖农膜,外层再盖一层彩条布,四周用沙袋将农膜及彩条布压实,防止漏气。当温度达到100T后,持续10h不间断加热,灭菌结束后,闷3—5h,等灶内温度下降到60T以下,取出菌袋放入接种棚内。菌袋接种汉中多采用开放式接种,一般在1月下旬进行,先将菌种足量放入棚内(按每袋菌棒0.25kg),再用二氯异尿酸钠消毒粉(保菇灵)进行棚内灭菌,30x4mx2.5m大棚用量为20包,灭菌4—5h。接种人员进入时用酒精喷雾灭菌,8人为一组,日接种20t,采用两端断面接种,先脱袋接种袋底菌种,再接种袋口,每袋用种0.2-0.25kg。
超声波法主要利用超声的空机械振动和空化效应来破坏灵芝抱子细胞壁.例如,Alzorqi等利用超声波提取P-D-葡聚糖,在优化条件下p-D-葡聚糖的产量为5.228mg/g.微波法.微波法利用微波的穿透能力和热效应,使细胞内部的温度迅速上升,从而使细胞内部的压力超过细胞壁膨胀所能承受的压力而破碎,促使其有效成分释放.例如,先将灵芝抱子进行微波处理,而后在低温深加工,灵芝抱子的破壁率可达99%以上.超临界提取法.超临界提取法利用气体在超临界状态下的性质,即流体的性质,使有效成分被流体萃取,Li等M运用超临界CO2萃取技术提取灵芝抱子,萃取率达到37%.机械法机械法的优点是操作简单、易行;缺点是机械设备投资大、运行成本较高.
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